Detalles de la obra

Título:
Generación de líneas transgénicas de pez cebra como herramienta para el estudio del tejido adiposo blanco
Autor(es):
Levin Ferreyra, Florencia
Pie de imprenta:
Montevideo: Universidad ORT Uruguay, 2019
Descripción física:
144 p. diagrs., fot., tbls., grafs. En línea
Nota de tesis:
Trabajo final de carrera (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Montevideo, 2019. Calificación: 100/100
Título obtenido:
Entregado como requisito para la obtención del título de Ingeniera en Biotecnología
Tutor:
Paola Lepanto Panizza; José Luis Badano Caballero
Tribunal:
Flavio Rafael Zolessi Elizalde; Andres Kamaid Toth
Resumen:
La obesidad es una enfermedad que se desarrolla cuando el consumo de energía excede el gasto de la misma, resultando en el aumento de reservas de energía en forma de triacilglicéridos (TAGs) dentro del tejido adiposo (TA). Se ha postulado que la asociación entre la obesidad y el desarrollo de enfermedades metabólicas está relacionada a factores genéticos y ambientales, cuya interacción genera alteraciones en la capacidad proliferativa del tejido adiposo y el desarrollo de inflamación. Para el estudio de la interrelación de estos factores se necesita el desarrollo de un modelo animal que facilite la investigación a nivel celular y molecular de la adiposidad regional in vivo. Las características del modelo de pez cebra son especialmente adecuadas para satisfacer estas necesidades. Posee un alto nivel de conservación a nivel de vías metabólicas y genes con el humano, además de que el TA es morfológica y funcionalmente homólogo al TA blanco de mamíferos. En este trabajo se propuso la generación de una línea transgénica de pez cebra reportera de TA. Se generaron construcciones de transgénesis utilizando el kit Tol2 en las que la expresión de EGFP era regulada por regiones promotoras de genes de expresión conocida en adipocitos. Los genes elegidos fueron: pparγ, fabp11a, c/ebpα, adipoqb y cfd. Luego de clonar y generar las construcciones de transgénesis, se inyectaron embriones de pez cebra y observándose el patrón de expresión de EGFP durante distintas etapas de su desarrollo. Se hizo una puesta a punto de los protocolos de criopreservación e inmunofluorescencia in toto y en criocortes con el fin de caracterizar en mayor profundidad los patrones de expresión de las líneas. Durante el análisis de los embriones y larvas de la primera y segunda generación, tanto in vivo como mediante cortes, se observó señal del reportero en diferentes tejidos confirmando la obtención de animales transgénicos. No se pudo detectar señal proveniente del TA. Esto indica que será necesario mejorar la definición de las regiones a utilizar como promotoras, o buscar otros factores que permitan la expresión restringida del reportero en el TA.
Referencias bibliográficas:
Incluye bibliografía.
Idioma:
Español
Tipo de material:
[Trabajo Final de Carrera]
Ubicación física:
Disponible en línea

Archivos asociados:

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Trabajo final de carrera 5.51MB application/pdf
Informe del corrector 26kB application/pdf