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Detalles de la obra

Título:
Establecimiento de modelos de epitelio intestinal en tres dimensiones
Subtítulo:
herramientas potenciales para el estudio del cáncer, la inflamación y el análisis de nuevos fármacos
Autor(es):
Harreguy Alfonso, María Belén
Pie de imprenta:
Montevideo: Universidad ORT Uruguay, 2018
Descripción física:
53 p. il., fot., tbls., grafs. En línea
Nota de tesis:
Trabajo final de carrera (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Montevideo, 2018. Calificación: 97/100
Título obtenido:
Entregado como requisito para la obtención del título de Ingeniera en Biotecnología
Tutor:
Romina María del Luján Pagotto; Mariela Raquel Bollati Fogolin
Tribunal:
Cristina Lourdes Touriño Ponte; María Inés Tiscornia Roble
Resumen:
El objetivo general de este proyecto consiste en generar y caracterizar modelos reporteros in vitro del epitelio intestinal empleando sistemas de cultivo en tres dimensiones, con el fin de contar con modelos cuya complejidad se asemeje más a los sistemas vivos. Para ello se estableció un protocolo de cultivo en 3D de la línea celular reportera HT-29-NF-κB-hrGFP y comparándose la capacidad de respuesta de los esferoides generados con la de un cultivo en monocapa (2D). Como otra alternativa 3D, se planteó el uso de células madre pluripotentes inducidas para su posterior diferenciación a organoides intestinales. En esta parte del trabajo se obtuvieron y caracterizaron células madres pluripotentes inducidas (iPSC) a partir de fibroblastos murinos de un modelo transgénico reportero para la actividad del factor de transcripción Nuclear Factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells. Los clones obtenidos fueron caracterizados por medio de la evaluación de la expresión de marcadores de pluripotencia y la generación de cuerpos embrionarios. Los resultados obtenidos demostraron una diferencia en la capacidad de respuesta de la línea celular reportera obteniéndose una menor sensibilidad a un estímulo pro inflamatorio en los esferoides comparado con su contraparte en monocapa. Fue posible obtener células madres pluripotentes inducidas, las cuales expresaron los marcadores de pluripotencia (Nanog, Oct-3/4, Sox2 y SSEA-1) y fueron capaces de generar cuerpos embrionarios. En cuanto a la función reportera, no fue posible detectar una respuesta de activación del NF-κB frente a un estímulo pro inflamatorio en iPSC, aunque sí en cuerpos embrionarios, lo que sugiere que este factor se encontraría inactivo en los estadios más indiferenciados.
Referencias bibliográficas:
Incluye bibliografía y anexos
Idioma:
Español
Tipo de material:
[Trabajo Final de Carrera]
Ubicación física:
Disponible en línea

Archivos asociados:

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Trabajo final de carrera 1.58MB application/pdf
Informe del corrector 76kB application/pdf