Detalles de la obra

Título:
Expresión heteróloga y purificación de Green Fluorescent Protein para su atrapamiento en nanohíbridos con sílica biomimética
Autor(es):
Larrieux Idarreta, Natalia Carolina; Maresca Stewart, Francisco Javier
Pie de imprenta:
Montevideo: Universidad ORT Uruguay, 2015
Descripción física:
53 p. il., fot., tbls., grafs. En línea
Nota de tesis:
Trabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Montevideo, 2015. Calificación: 95/100
Título obtenido:
Entregado como requisito para la obtención del título de Licenciado en Biotecnología
Tutor:
Lorena Betancor Dutrenit; Josefina Louge Argañaraz
Tribunal:
Paula Isabel Tucci Pi; Erienne Jackson Carvalho
Resumen:
El objetivo principal del presente proyecto fue alcanzar la expresión y purificación de una variante de la Green Fluorescent Protein (GFP) y su posterior atrapamiento en nanopartículas de sílica biomimética para generar nanohíbridos de sílica-GFP estables. La primera etapa implicó la generación de un sistema de expresión funcional para GFP en Escherichia coli que permitiera facilitar su purificación mediante un paso cromatográfico de afinidad. Luego se desarrolló un protocolo de purificación, que permitió recuperar la proteína con un rendimiento del 43,5% y un factor de purificación de 110,3. Como la GFP obtenida luego del procedimiento de purificación desarrollado poseía un alto grado de pureza, se procedió a su inmovilización en nanopartículas de sílica biomimética. Las nanopartículas de este material son fáciles de sintetizar, y tienen la capacidad de ser funcionalizadas de forma efectiva y atrapar biomoléculas, generando nanohíbridos con un rango más amplio de aplicaciones y funciones. Los nanohíbridos sintetizados fueron caracterizados morfológicamente mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM). Finalmente, se realizaron estudios preliminares de estabilidad de fluorescencia de la proteína obtenida, tanto inmovilizada como soluble, desafiándola en distintas condiciones de pH y de composición del medio, utilizando DMEM y PBS. Se determinó que tanto la proteína soluble como inmovilizada en los nanohíbridos disminuye su intensidad de fluorescencia luego de 20 horas de incubación en DMEM o PBS.
Referencias bibliográficas:
Incluye bibliografía e índice de abreviaturas
Idioma:
Español
Tipo de material:
[Trabajo Final de Carrera]
Ubicación física:
Disponible en línea

Archivos asociados:

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Trabajo de Grado 1.96MB application/pdf
Informe del corrector 26kB application/pdf