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Detalles de la obra

Título:
Generación y caracterización de líneas celulares reporteras de la actividad del factor de transcripción nuclear factor kappa-b
Autor(es):
Mastropietro García, Giuliana Paula
Pie de imprenta:
Montevideo: Universidad ORT Uruguay, 2014
Descripción física:
74 p. il., tbls., grafs.. En línea
Nota de tesis:
Trabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Montevideo, 2014. Calificación: 100/100
Título obtenido:
Entregado como requisito para la obtención del título de Licenciada en Biotecnología
Tutor:
Mariela Raquel Bollati Fogolin
Tribunal:
Marcelo Rafael Hill Mongabure; Magdalena Cárdenas Rodriguez
Resumen:
En el presente trabajo se obtuvo una línea celular reportera de la actividad del Nuclear Factor Kappa-B (NF- κB) derivada de la línea parental Caco-2. Esta se caracterizó junto con la línea celular HT-29-pNF-κB-hrGFP, previamente generada en el laboratorio, y se comparó la respuesta de ambas frente a estímulos pro-inflamatorios. Para la generación de la línea reportera, se procedió a transfectar establemente con el plásmido pNFκB-hrGFP, que contiene el gen que codifica para la proteína GFP bajo el control de un promotor con múltiples sitios de unión a NF-κB, y luego se seleccionó con higromicina. Posteriormente, las fracciones celulares que respondieron a estímulos pro-inflamatorios fueron enriquecidas y clonadas mediante un separador celular. En aquellos clones seleccionados, se estudió, mediante citometría de flujo, la cinética de activación de NF-κB (porcentaje de células positivas para GFP) y su respuesta frente a diferentes concentraciones de los estímulos: Factor de Necrosis Tumoral-κ (del inglés, TumorNecrosisFactor-κ), Interleuquina-1βy Lipopolisacárido. Se observó una respuesta diferencial frente a los estímulos, incluso en clones de la misma línea, tanto en la curva dosis respuesta, como en la cinética de activación. Actualmente, se dispone de dos líneas reporteras bien caracterizadas, lo que permitirá monitorear compuestos moduladores de la vía NF-κB en estudios comparativos entre ambas.
Notas:
Co-tutores: Karen Perelmuter Schein y María Inés Tiscornia Roble
Vencimiento de confidencialidad: 24/04/2016.
Referencias bibliográficas:
Incluye bibliografía
Idioma:
Español
Tipo de material:
[Trabajo Final de Carrera]
Ubicación física:
Disponible en línea

Archivos asociados:

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Trabajo de Grado 2.21MB application/pdf
Informe del corrector 46kB application/pdf